實驗性能

在試劑組panel設計中添加細胞死活染料的一個關鍵目標是可以將死細胞進行區分。 死細胞非特異性地結合抗體可能會造成分析數據出現誤差。如果試劑失去有效性,染色效率下降導致更多的死細胞無法清晰識別而被誤判為活細胞,或者,如果染色異常增加,更多活細胞以死細胞呈現。 穩定的檢測性能需要持續穩定的試劑。

貝克曼庫爾特充分驗證了我們的試劑質量。 多個操作者對每種試劑的多個批次進行測試,以確定最佳染色濃度和反應時間。 對每個新批次進行評估,以確保滿足既定的質量控制參數。

 

ViaKrome 405 ViaKrome 561 ViaKrome 638 ViaKrome 808
測試 1 19.6 19.8 21.2 15.5
測試 2 19.3 23.9 21.8 17.9
測試 3 21.0 20.6 22.9 17.0
測試 4 17.4 24.0 17.8 16.3
平均死細胞百分比( %) 19.3 22.1 20.9 16.7
SD 1.5 2.2 2.2 1.0
CV % 7.6% 9.9% 10.6% 5.9%

 

檢測精度

將Jurkat細胞與經ViaKrome可固定活性染劑染色(55 °C for 10 minutes)的Jurkat細胞混合。 快速染色之後立即獲取樣本(n=4)。死細胞群的百分比,數據變異系數的統計分析結果如下圖。 實驗CV 的范圍由 5.9 到 10.6%。 

在18-25° 時 ViaKrome 405 可固定活性染料的穩定性

ViaKrome 405 Room Temperature Reagent Stability

在18-25° 時 ViaKrome 561 可固定活性染料的穩定性

ViaKrome 561 Room Temperature Reagent Stability

在18-25° 時 ViaKrome 638 可固定活性染料的穩定性

ViaKrome 638 Room Temperature Reagent Stability

在18-25° 時 ViaKrome 808 可固定活性染料的穩定性

ViaKrome 808 Room Temperature Reagent Stability

儲存液的穩定性

將特定的 ViaKrome 可固定活性染料在 PBS 中回溶,並立即使用(0 小時)或儲存在 18-25 ℃避光保存,最多可保存 4 天(96 小時)。將Jurkat細胞與經ViaKrome可固定活性染料染色的 Jurkat 細胞(55 °C for 10 minutes) 混合,並在 Cyto FLEX LX 流式細胞儀上收集數據。 該圖顯示死細胞(條形圖)的百分比以及每個時間點的信噪聲比(線)。 在所研究的期間,這兩項檢測結果保持一致。