Apostle MiniMax 有效分離富集試劑組的實驗效能及數據
從血漿中進行 cfDNA 萃取以用於液體活檢
Apostle MiniMax 有效游離 DNA 萃取試劑組（標準盤）是基於磁珠技術的游離 DNA （cfDNA）萃取試劑組。Apostle MiniMax 試劑組已被證明在手動和自動化工作流程中從人類血漿中純化 cfDNA。
- 可處理 1-5mL 血漿樣品
- 與多種採血管相容
- 使用該試劑盒萃取的 cfDNA 的純度被證明適用於下游 PCR 應用及 NGS 檢測s
與多種採血管相容
圖1（下圖）：使用 Apostle MiniMax 試劑組和市場上主流萃取試劑組（Kit A）從 cfDNA Tube 1和 cfDNA Tube 2 中收集的 1mL 血漿中萃取 DNA。同時使用 Apostle MiniMax 試劑組、市場上主流萃取試劑組（Kit A）及磁珠萃取試劑盒（Kit B）從 EDTA 抗凝管 1mL 血漿中萃取 DNA。採用 Quant-iT PicoGreen dsDNA 檢測試劑組（Thermo Fisher）對 DNA 進行定量。Error bar 表示三個重複的標準偏差。對於每個樣品，Apostle Max 試劑組有較高的 DNA 萃取產量。使用安捷倫生物分析儀 2100 進行分析 DNA 片段大小，實驗證明，從三種不同採血管中萃取 DNA，均可獲得預期片段大小 cfDNA（±170 bp）。
卓越的再現性
圖2（下圖）：使用 Apostle MiniMax 試劑組和其他品牌試劑組從 cfDNA Tube 1 和 cfDNA Tube 2 中收集的 1mL 血漿中萃取 DNA，每種方法重複一次，結果顯示，採用 Apostle MiniMax 試劑組萃取的兩個樣品幾乎相同，而使用試劑組 A 萃取 DNA 的曲線則明顯不同 。使用安捷倫生物分析儀 2100 分析分離的 cfDNA；波峰 35 和波峰 10380 為內部QC。
圖 3（ A），分別採用 Apostle MiniMax 試劑組（紅色曲線）和市場主流的萃取試劑組（藍色曲線）從 4 mL 血漿中分離富集 cfDNA。萃取的 cfDNA 使用生物分析儀 2100 分析。圖 3（B）顯示，分別採用 Apostle MiniMax 試劑組（紅色曲線）和市場主流的萃取試劑盒（藍色曲線）從 20 mL 尿液中分離富集 cfDNA。萃取的 cfDNA 使用生物分析儀 2100 分析，並標出 ~170bp 的主要波峰。波峰 35 和波峰10380 是內部QC。如圖示，對於血漿和尿液樣品，Apostle MiniMax 試劑組的表現優於主要替代產品。
DNA 突變檢測和 qPCR 驗證
在圖 4 中，將 20µL 含有 EGFR C2573T>G L858R 突變的 DNA 合成片段（170 bp）摻入 1mL 的 TE 緩衝液（藍色）或血清（紅色），濃度範圍為 0.001ng/µL 到 1ng/µL。使用 Apostle MiniMax 試劑組萃取：A） 擴增曲線，顯示突變片段在各個稀釋濃度上， 使用 MiniMaxTM 有效游 離 DNA 分離富集試劑組萃取前和萃取後呈現高度的重疊，B）用突變 DNA 片段標準品原液進行螢光定量 PCR，並得出標準曲 線。將 MiniMaxTM 有效游離 DNA 分離富集試劑組萃取後產物曲線與之對 比，呈現出 DNA 片段 90% 以上的萃取效率。在圖 5中，使用 Aposlte MiniMax 試劑盒和其他市場主流的萃取試劑組（Kit A）之間的 qPCR 表現進行了比較。如圖示，實驗證明，從三種不同採血管中萃取 DNA，Apostle MiniMax 試劑組比試劑組 A 表現更優異。
DNA 產量隨血液樣品增加而提高
在圖 6 中，從 Apostle MiniMax EDTA 管中的 1、3 和 5 mL 血漿中萃取 DNA。如果使用 Apostle MiniMax 試劑組，DNA產量會隨著樣品起始量增加而增加。使用 Quant–iT PicoGreen dsDNA 檢測試劑組（Thermo Fisher）對 DNA 進行定量。Error bar 表示三個複製的標準偏差。
工作流程圖
- 血漿裂解
- cfDNA 與磁珠結合
- 磁珠與污染物分離
- 清洗磁珠
- 再次清洗磁珠
- 洗脫 cfDNA
產品：Apostle MiniMax 游離 DNA 萃取試劑盒（標準版）
Apostle MiniMax 試劑組可根據您的實驗通量需求提供三種試劑組規格：
| PART # | NAME | PREPS |
|---|---|---|
| C40603 | Apostle MiniMax™ | 50 |
| C40604 | Apostle MiniMax™ | 10 |
| C40605 | Apostle MiniMax™ Large Volume | 50 |
評估 Apostle MiniMax 有效游離 DNA 提取試劑組
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